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    ELISA实行必读秘籍
    公布日期:2016/6/14      欣赏:4004

    1、阳性比较不显色

     漏加阳性比较

     阳性比较孔忘加酶或忘加显色剂 

     阳性比较受净化

     

    2、阳性比较显色浅(HBeAb  HBcAb阴性比较显色浅)

    试剂和保管不妥、活性降落

    在利用前试剂盒未安排在室温均衡

    温育工夫不敷或孵育温渡过低

    洗板浸泡工夫过长、洗板次数过多

    利用不准确的洗液

     洗液中含有防腐剂同时残留量过多

    洗板后酶标板被干透

    读数时利用波长不准确

    滤光片不干净或滤光片地位错误

    读数时酶标板安排地位错误

    阳性比较活性降落

    酶标失活

     

    3、阴性比较显色(HBeAb、HBcAB除外)

    实行历程受净化

    阴性比较净化

    酶滴在孔壁上

     

    4、整板不显色

    试剂和保管不妥、曾经失活

    遗忘加酶、可反省滴瓶内酶量

    遗忘加抗原或中和试剂

    遗忘加显色剂A或显色剂B

     

    5、阳性比较读数不正常

    参加标本后未举行须要的混匀

    标本浓缩错误

    加样量不准确

    冷冻标本未完全消融混匀

    标本中含有防腐剂

     

    6、血清本底高

    试剂盒敏捷度高

    加样时利用统一枪头、交织净化

    孵育工夫过长或温渡过高

    洗板次数不敷,浸泡工夫短

    洗板时洗液量少或残留量多

    洗板时洗液量过多、串孔

    洗板机管道中有霉菌生长

    洗液瓶混用

    洗板机洗板头壅闭或洗板机洗板头地位错误

     设置装备摆设洗液的去离子水或蒸馏水被净化

    停止液浓度不敷,没有充实混匀,或停止液被净化

    读数时酶标板底部有水蒸气固结

    酶标仪偏向

     

    7、假阳性后果

    实行用具被净化

    血清中呈现纤维卵白凝聚

    血清标本中呈现过多的红细胞

    血浆标本处置不妥

    标本中含有尘土、颗粒或细菌等

    标本被重复冻融

    加标本落伍行不准确的振荡

    沿孔壁上参加标本,加样后呈现过多的气泡

    酶标滴加在孔壁上,洗板未洗净

    混用洗液或洗液浓缩错误

    洗液瓶中、管道或设置装备摆设洗液的水中有霉菌

    洗板次数不敷或浸泡工夫短

    洗板时洗液量少或残留量多

    洗板时洗液量过多、串孔

    读数时酶标板底部有水蒸气固结

    洗液瓶、废液瓶混用

     读数历程中板孔中有气泡

    酶标仪偏向

     

    8、统一板内反复性差

    标本混匀不充实

    试剂混匀不充实

    标本与酶联合物混匀不充实

    加样技能差别

    加样器妨碍或加样器被净化

    加样工夫过长招致孵育工夫差别

    孵育器外部的温度纷歧致,形成酶标板孔间的孵育温度差别

    读数时酶标板孔间有气泡

     

    9、HCV血清本底高

    敏捷度高

    样本浓缩液加液量不敷100ul

    枪头深化血清过深,致使外壁沾有血清招致加样偏多(>10ul)

    统一孔加了两次样本

    其他大概缘故原由参考HBsAg

     

    10、HIV阳性比较低

    误将阳性比较浓缩

    阳性比较未混匀

    加液量不敷

    其他大概缘故原由参考HBsAg

     

    11、HIV血清本底高

    尺度变动,敏捷度进步

    标本浓缩液加液量不敷100ul

    枪头深化血清过深,致使外壁沾有血清招致加样偏多(>10ul)

    统一孔加了两次样本

    其他大概缘故原由参考HBsAg

     
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